生物技术与工程思维导图

柯柯

2024-05-24

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基因工程

食品工业方面

与鉴定

生物技术与工程详述

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思维导图大纲

胚胎工程

Ⅰ定义：对生殖细胞、受精卵或早期胚胎细胞进行多种显微操作和处理，然后将获得的胚胎移植到雌性动物体内生产后代，以满足人类的各种需求。 Ⅱ理论基础：哺乳动物自然受精和胚胎早期发育。 Ⅲ实质：体外条件下, 对动物自然受精和早期胚胎发育条件进行模拟操作。

Ⅰ体外受精过程：包括受精前的准备阶段（①精子获能；②卵子的准备，培育到MⅡ期）和受精阶段（①精子的顶体反应使它穿越放射冠和透明带；②在精子触及卵细胞膜的瞬间，发生透明带反应，阻止后来的精子进入透明带；③精子入卵后，发生卵细胞膜反应，拒绝其他精子再进入卵内。③之后精子形成雄原核，同时卵子完成减数分裂Ⅱ，释放第二极体后形成雌原核；④雌雄原核靠近，核膜消失，第一次卵裂即将开始）。 Ⅱ 受精的标志：观察到两个极体（第二极体的形成）或者雌、雄原核。受精完成的标志：雌雄原核融合形成合子。 Ⅲ胚胎早期发育：受精卵→卵裂期（细胞数量增加，但胚胎的总体积不增加）→桑葚胚→囊胚（有细胞分化，需要孵化。①滋养层细胞：将来发育成胎膜和胎盘；②内细胞团：将来发育成胎儿的各种组织，有细胞全能性。③囊胚腔）→原肠胚（有胚层分化，人的话有内、中、外三个胚层和原肠腔）。

胚胎工程技术及其应用

体外受精技术：包括卵母细胞的采集、精子的获取和受精等步骤。采集的卵母细胞和精子要分别进行成熟培养（MⅡ期）和获能处理，然后才能用于体外受精。通过人工操作使卵子在体外受精，经过培养发育为早期胚胎后再进行移植产生的个体叫做试管动物。

胚胎移植：Ⅰ定义：是指将通过体外受精及其他方法得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术。 Ⅱ实质：早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移。 Ⅲ过程：胚胎移植主要包括供体、受体的选择和处理，配种或人工授精，胚胎的收集、检查、培养和保存，胚胎的移植，以及移植后的检查等步骤。 Ⅳ相关细节：①供体母牛需遗传性状优良，生产能力强。受体母牛要有健康的体质和正常繁殖能力。②供体母牛和受体母牛需用孕激素或雌激素进行同期发情处理，保证胚胎在移植前后所处的生理环境相同。 ③对供体母牛用外源促性腺激素进行超数排卵处理，以获得更多成熟卵子。④可用手术法或非手术法进行收集胚胎，之后对胚胎进行质量检查，若发育到桑葚胚或囊胚则可以进行胚胎移植。⑤移植后需对受体进行妊娠检查。 Ⅴ意义（优点）：可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力；大大缩短了供体本身的繁殖周期；获得比自然繁育多的后代，大大促进了我国畜牧业的发展。 Ⅵ 地位：胚胎工程的最终技术环节，推动胚胎工程其他技术的研究和应用。

胚胎分割：Ⅰ定义：采用机械方法将早期胚胎切割成2等份、4等份或8等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术。 Ⅱ理论基础：动物细胞的全能性。物质基础：每个细胞核内具有相同的遗传物质。Ⅲ繁殖方式：无性繁殖或克隆。 Ⅳ主要仪器设备：体视显微镜和显微操作仪。分割工具：分割针或分割刀。 Ⅴ过程：对发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚进行分割。分割囊胚时要注意将内细胞团均等分割。取囊胚的滋养层细胞做DNA分析，鉴定性别。分割后的胚胎可以直接移植给受体，或经体外培养后，再移植给受体。（分割次数越多，分割后的胚胎成活的概率越小）

基因工程

定义

指按照人们的愿望,通过转基因等技术，赋予生物新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫作重组DNA技术。原理：基因重组。

基本工具

限制性内切核酸酶（限制酶）

实质：能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。

来源：主要是从原核生物中分离纯化出来。

EcoRⅠ限制酶：产生黏性末端。SmaⅠ限制酶：产生平末端。

DNA连接酶

E.coliDNA连接酶：从大肠杆菌中分离出来的，连接具有互补黏性末端的DNA片段；

T4DNA连接酶：从T4噬菌体中分离出来的，既可以“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端，又可以“缝合”双链DNA片段的平末端（效率相对较低）。

载体

种类：质粒（质粒是一种裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外，并具有自我复制能力的环状双链DNA分子）、噬菌体、动植物病毒等。

作用：①作为运载工具，将目的基因导入受体细胞中；②能在受体细胞内对目的基因进行大量复制。

需具备的条件：①能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。②具有一个或多个限制酶切点，供外源DNA片段（目的基因）插入其中。③具有某些标记基因，便于进行鉴定和选择。④必须是安全的，对受体细胞无害。

基本操作程序

目的基因的筛选与获取（前提）

目的基因：在基因工程的设计和操作中，用于改变受体细胞性状或获得预期表达产物等的基因。主要是指编码蛋白质的基因。

筛选方法：①从相关的已知结构和功能清晰的基因中进行筛选；②测序技术、遗传数据库、序列比对工具等技术的应用。

PCR

全称：聚合酶链式反应。含义：是一项根据DNA半保留复制的原理，在体外提供参与DNA复制的各种组分与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。基本条件：DNA母链，4种脱氧核苷酸，耐高温的DNA聚合酶，两种引物（短单链核酸），缓冲溶液，Mg²⁺

过程：变性（温度超过90°C，双链DNA解聚为单链）→复性（温度下降到50°C左右，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合）→延伸（温度上升到72°C左右，4种脱氧核苷酸在耐高温的DNA聚合酶作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链）；成指数形式扩增。

常采用琼脂糖凝胶电泳来鉴定PCR的产物。

基因表达载体的构建（核心）

构建目的：让基因在受体细胞中稳定存在，并且遗传给下一代；同时使目的基因能够表达和发挥作用。

组成：目的基因、标记基因（鉴定受体细胞中是否含有目的基因）、启动子（位于基因上游，紧挨转录的起始位点，是RNA聚合酶识别和结合的部位）、终止子（位于基因下游，使转录在所需要的地方停下来）、复制原点。

将目的基因导入受体细胞（关键，也是唯一不涉及碱基互补配对原则的步骤）

植物

花粉管通道法：受体细胞为受精卵，为我国独创。

农杆菌转化法

受体细胞：受精卵或体细胞。

转化：指目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。

过程中：两次拼接，两次导入。（各有一次非人工操作）

动物

显微注射法：受体细胞为动物的受精卵（或胚胎干细胞，均有细胞全能性）。

微生物

Ca²⁺处理法（或感受态细胞法）：用Ca²⁺处理大肠杆菌细胞，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，这种状态称为感受态，处于感受态的细胞就是感受态细胞。

目的基因的检测与鉴定（保证）

检测目的：检测目的基因进入受体细胞后，是否维持稳定核表达其遗传特性。

应用

农牧业方面

转基因抗虫植物、转基因抗病植物、转基因抗除草剂植物、改良植物的品质（营养价值、观赏价值）。

①提高动物的生长速率（将外源生长激素基因导入鲤鱼）；②改良畜产品的品质（肠乳糖酶基因，降低乳糖含量）。

医药卫生领域

乳腺生物反应器（也叫乳房生物反应器）的要求：雌性，处于泌乳期才能收集药物；膀胱生物反应器：不受性别和年龄的限制，周期短，易收集和提纯更高。

器官移植

选择猪（需转基因）的原因：①目前，人体移植器官短缺是一个世界性难题；②猪的内脏构造、大小、血管分布与人极为相似； ③猪体内隐藏的、可导致人类疾病的病毒远远少于灵长类动物。

食品工业方面

基因工程菌：用基因工程的方法，使外源基因得到高效表达的菌类。

利用基因工程菌生产食品工业用酶（凝乳糖酶、淀粉酶、脂肪酶。还利用了发酵工程）、氨基酸和维生素等。还可以培育出“超级细菌”来处理环境污染......

实验

DNA的粗提取与鉴定

粗提取：DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精（可初步分离DNA与蛋白质）。DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，能溶于2mol/L的NaCl溶液。

鉴定：在一定温度（沸水浴）下，DNA遇二苯胺试剂（现配现用）会呈现蓝色。蓝色深浅与DNA含量的多少有关。

过程：取材——研磨——过滤——析出——鉴定。

DNA片段的扩增及电泳鉴定

扩增

原理：①利用PCR可以在体外进行DNA片段的扩增。②PCR利用了DNA的热变性原理，通过调节温度来控制DNA双链的解聚（主要破坏氢键）与结合。③PCR仪实质上就是一台能够自动调控温度的仪器，一次PCR一般要经历30次循环。

过程：准备——移液——离心——反应。（预变性：使DNA充分变性，以利于引物更好地和模板结合）

电泳鉴定

原理：①DNA分子具有可解离的基团，在一定的PH下，这些基团可以带上正电荷或负电荷。在电场的作用下，这些带电分子会向着与它所带电荷相反的电极移动，这个过程就是电泳。 ②在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构像等有关。 ③凝胶中的DNA分子通过染色，可以在波长为300nm的紫外灯下被检测出来。

过程：配制琼脂糖溶液——制备凝胶——加样——电泳——观察结果。（荧光强度与DNA含量的多少呈正相关）

发酵工程

发酵工程的定义：是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品。它涉及菌种的选育和培养、产物的分离和提纯等方面。发酵的定义：是指人们利用微生物，在适宜的条件下，将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要的产物的过程。传统发酵技术：直接利用原材料中天然存在的微生物，或利用前一次发酵保存下来的面团、卤汁等发酵物中的微生物进行发酵、制作食品的技术。

传统发酵技术

泡菜制作：①配置盐水：浓度为质量分数为5%~20%，并煮沸（杀菌，除氧），冷却待用（不影响乳酸菌的生命活动）；②蔬菜处理装坛。新鲜蔬菜（亚硝酸盐含量低），泡菜坛要先检查气密性，严格控制厌氧条件。装至八成满（泡菜发酵初期，大肠杆菌、酵母菌等较为活跃，产生较多的CO₂，防止发酵液溢出坛外；防止因太满使盐水未完全淹没菜料而导致菜料变质腐烂；留有一定空间，方便拿取泡菜）；③加盐水（没过全部菜料），盖好坛盖；④封坛发酵（向坛盖边沿的水槽注满水，之后注意经常补水（创造无氧环境）。

果酒制作：发酵瓶、榨汁机清洗消毒，晾干备用→挑选葡萄→冲洗（先冲洗后去枝梗）→榨汁装瓶（留有1/3空间，可为发酵初期酵母菌的大量繁殖提供氧气，也可以防止发酵旺盛时汁液的溢出）→盖好瓶盖，在18~30°C的温度下进行发酵，中间每隔12小时拧松瓶盖一次（不是打开，防止发酵液被污染），再拧紧。发酵时间为10~12天。检测：①闻；②品尝；③用酸性条件下的重铬酸钾溶液检测橙色→灰绿色。

果醋制作：当葡萄酒制作完成后，打开瓶盖，盖上一层纱布，进行葡萄醋的发酵。发酵温度为30-35℃，时间为7-8天。检测：①闻；②品尝；③使用pH试纸检测检测和比较发酵前后的pH值；④观察醋酸菌膜是否形成。

微生物的培养技术

培养基的配制：Ⅰ定义：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。作用：用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。 Ⅱ分类：物理状态上：固体培养基（有琼脂等凝固剂）和液体培养基；功能上分为选择培养基（在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基）和鉴别培养基。成分上分为天然培养基和合成培养基。Ⅲ成分：一般都含有水、碳源、氮源、无机盐等营养物质。培养乳酸杆菌时需添加维生素；培养霉菌时需将培养基调至酸性；培养细菌时一般需调至中性或弱碱性；培养厌氧性微生物时需创造无氧条件。

获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。无菌技术主要包括消毒和灭菌。消毒是指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物。灭菌则是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。（湿热灭菌和干热灭菌的选择）

培养物定义：在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体。纯培养物定义：由单一个体繁殖所获得的微生物群体。纯培养的定义：获得纯培养物的过程就是纯培养。菌落定义：分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体，这就是菌落。微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。注意事项：①培养基需高压蒸汽灭菌，空的培养皿用干热灭菌法。②倒平板：待培养基冷却至50°C左右时，在酒精灯火焰附近（无菌环境）倒平板。，倒完后立即盖上皿盖，培养基冷却凝固后，将培养皿倒过来放置（既可以防止培养基表面的水分挥发；又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染）。③接种方法：平板划线法和稀释涂布平板法（具体过程见课本P13和P17。注意从接种工具，最后菌落现象等方面进行区分）。④需将接种后的平板和一个未接种的平板（作对照，若该培养皿没有菌落出现，则说明培养基没有被污染）倒置，放入28°C左右的恒温箱中培养24~48h。

微生物的数量测定：平板划线法不能用来计数。稀释涂布平板法：①计算原则：选择30-300个菌落的平板进行计数；每个稀释度至少取3个平板取其平均值。②计算方法：每克样品中的活菌数=某一稀释度下平板上生长的平均菌落数除以涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)乘以稀释倍数。③统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。显微镜直接计数法：统计结果一般是活菌数和死菌数之和，比实际值偏大。

常用的鉴别培养基（不影响其他微生物的生长）：①加入酚红可鉴别有没有能分解尿素的微生物，若有，则会变红；②加入刚果红，可鉴别有没有能分解纤维素的微生物，若有，则会出现以这些菌为中心的透明圈（课本P20）；③加入伊红--亚甲蓝可鉴别有没有大肠杆菌，若有，大肠杆菌菌落呈深紫色，并有金属光泽（课本P30)

发酵工程的应用

基本环节：一般包括①菌种的选育（来源有：从自然界中筛选、诱变育种、基因工程育种等）、②扩大培养（一般用液体培养基，目的是增大菌种数量）、③培养基的配置、④灭菌、⑤接种、⑥发酵罐内发酵（中心环节。环境条件会影响微生物代谢物形成的例子：谷氨酸的发酵生产：在中性和弱碱性条件下会积累谷氨酸；在酸性条件下则容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺）、⑦分离、提纯产物（如果发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束之后，采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，即可得到产品。如果产品是代谢物，可根据产物的性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品）、⑧获得产品。

Ⅰ发酵工程的优点（或特点）：生产条件温和、原料来源丰富且价格低廉、产物专一、废弃物对环境的污染小和容易处理等。 Ⅱ应用：①食品工业上：生产传统的发酵食品、各种各样的食品添加剂、酶制剂等；②医药工业上：生长激素释放抑制激素等；③农牧业上：生产微生物肥料（作用：增进土壤肥力，改良土壤结构，促进植株生长）、微生物农药、微生物饲料（单细胞蛋白：是通过发酵获得的大量微生物菌体，不是蛋白质）；④其他方面：利用纤维废料发酵生产酒精、乙烯等能源物质、利用嗜热菌、嗜盐菌生产洗涤剂等。

啤酒的工业化生产流程：分为主发酵和后发酵两个阶段。发芽（释放淀粉酶）→焙烤（加热杀死种子胚但不使淀粉酶失活）→碾磨→糖化→蒸煮→发酵（主发酵结束，之后为后发酵）→消毒→终止。

蛋白质工程

定义:蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过改造或合成基因（实质），来改造现有蛋白质，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。

改造基因而不直接改造蛋白质的原因：①如果对蛋白质直接改造，即使改造成功，被改造的蛋白质也是无法遗传下去的。 ②对基因进行改造比对蛋白质直接改造要容易操作，难度较小。

崛起原因：①基因工程原则上只能产生自然界已存在的蛋白质(天然蛋白)；②天然蛋白质的结构和功能符合特定物中生存的需要，却不一定完全符合人类生产和生活的需要。

基本思路：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需要的蛋白质。（前半部分为中心法则的逆推，基因合成后进行转录翻译，符合中心法则）

应用：①速效胰岛素（B29位脯氨酸替换为天冬氨酸或将它与B29位的赖氨酸交换位置）；②改造天然干扰素，延长保存时间（半胱氨酸变为丝氨酸）.......

蛋白质工程是一项难度很大的工程，主要是因为蛋白质发挥功能必须依赖于正确的高级结构，而这种高级结构往往十分复杂。

细胞工程

定义：是指应用细胞生物学、分子生物学和发育生物学等多学科的原理和方法，通过细胞器、细胞或组织水平上的操作，有目的地获得特定的细胞、组织、器官、个体或其产品的一门综合性的生物工程。

植物细胞工程

植物组织培养技术

定义：指将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术。

原理：植物细胞的全能性（细胞经过分裂和分化后，仍然具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能）。

过程：接种外植体（需提前消毒）→脱分化形成愈伤组织（一般不需要光照）→再分化诱导生芽、根（需要适当时间和强度的光照，形成结果与生长素和细胞分裂素的比例和使用顺序有关，生长素多易生根，细胞分裂素多易生芽）→对植物幼苗进行移栽。常用培养基为MS培养基，其中蔗糖的作用：提供能量；维持渗透压。

植物体细胞杂交技术

定义：将不同来源的植物细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新植物体的技术。 ①繁殖方式：无性繁殖。 ②分裂方式：有丝分裂。 ③变异类型：染色体（数目）变异。

过程：先用纤维素酶和果胶酶去除两种不同植物细胞的细胞壁，得到原生质体（关键环节）→用物理法（电融合法、离心法等）或化学法（聚乙二醇融合法、高Ca²⁺——高pH融合法）进行融合→再生出细胞壁（与高尔基体和线粒体有关，是原生质体融合成功的标志）→脱分化形成愈伤组织→再分化诱导生芽生根形成杂种植株→进行移栽。完成标志：培育出新植物体。

原理：植物体细胞融合：细胞膜具有一定的流动性。植物组织培养：植物细胞的全能性。意义：打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种。（克服不同种生物远缘杂交的不亲和性）

应用

植物繁殖的新途径

快速繁殖（也叫微型繁殖技术）：优点①高效、快速地实现种苗的大量繁殖；②保持优良品种的遗传特性； ③室内生产，不受自然生长季节的限制。

作物脱毒：选材部位：植物的茎尖组织。选材原因：植物的顶端分生区附近的病毒极少，甚至无病毒。优点：提高作物的产量和品质。

作物新品种的培育

单倍体育种：Ⅰ原理：植物细胞的全能性和染色体（数目）变异。 Ⅱ过程：花药（或花粉）离体培养得到单倍体植株幼苗（植物组织培养技术）→人工诱导染色体加倍（秋水仙素或低Ⅲ温处理）→得到纯合二倍体植株→选择出优良品种。 Ⅲ优点：快速得到遗传性状相对稳定的纯合二倍体植株，极大地缩短了育种年限，节约了大量的人力和物力；也是进行细胞诱变育种和研究遗传突变地理想材料。

突变体的利用：Ⅰ原理：植物细胞的全能性和基因突变。Ⅱ过程：接种外植体（需提前消毒）→脱分化形成愈伤组织→诱变处理愈伤组织→再分化生芽生根得到突变体→筛选培育得到新品种。 Ⅲ优点：提高变异频率，加快育种进程，大幅度地改良某些性状。（意思对即可） Ⅳ缺点：突变具有不定向性和低频性等特点，需处理大量突变材料并从中选出符合人们需要的品种。

细胞产物的工厂化生产

初生代谢：生物生长和生存所必须的代谢活动。其产物就是出生代谢物。次生代谢物：不是生物基本生命活动所必需的产物。

过程：移植外植体→脱分化形成愈伤组织→将愈伤组织分散开制成细胞悬液→进行培养、提取出细胞产物（主要在液泡中）（最终得到的是细胞产物，没有得到植物体，不能体现植物细胞的全能性！！！！！）

动物细胞工程

动物细胞培养技术（基础）

Ⅰ定义：从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适当的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。 Ⅱ原理：细胞增殖（有丝分裂）。 Ⅲ培养对象：胚胎或幼龄动物的细胞。 Ⅳ目的：获得细胞或细胞产物。

培养条件：①营养条件：糖类（通常选择葡萄糖）、氨基酸、无机盐、维生素...通常需加入动物血清等天然成分。一般为液体培养基，也称为培养液。②无菌、无毒的环境。可加入适量抗生素来防止杂菌污染。定期更换培养液，以便清楚代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。③温度（多以36.5±0.5°C为宜）、pH（多为7.2~7.4），渗透压。④气体环境：95%空气和5%CO₂（O₂是细胞代谢所必需的，CO₂主要作用是维持培养液的pH）。

过程：取动物组织（一般取材于动物胚胎或幼龄动物的组织、器官）→用机械的方法或用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，将组织分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养（两种状态：悬浮生长和贴壁生长，其中贴壁生长的细胞会出现接触抑制的现象，因此需要分瓶）→分瓶（悬浮生长的细胞直接离心法收集，贴壁生长的细胞需重新用胰蛋白酶处理，使之分散为单个细胞后再用离心法收集），进行传代培养。（整个培养过程在CO₂培养箱中进行）传代50次以后，细胞遗传物质可能会发生变化，出现异倍体核型，可连续传代（癌细胞）。

干细胞的培养及应用

胚胎干细胞（简称ES细胞），存在于早期胚胎中，具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能。（体外培养需要分化诱导因子才能进行分化）

成体干细胞：成体组织或器官内的干细胞。一般认为它具有组织特异性，只能分化成特定的细胞或组织，不具有发育成完整个体的能力。造血干细胞是发现最早、研究最多的、应用最成熟的一类成体干细胞。

诱导多能干细胞：通过体外诱导小鼠成纤维细胞（后来发现已分化的T细胞、B细胞也可以），获得了类似胚胎干细胞的一种细胞，简称iPS细胞。

动物细胞融合技术

Ⅰ定义：使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。 Ⅱ原理：细胞膜的流动性。 Ⅲ结果：获得杂交细胞。 Ⅳ融合方法：物理法、化学法（与植物原生质体融合相同），多了一种灭活病毒诱导法（动物细胞融合所特有）。 Ⅴ融合完成的标志：细胞核融合形成杂交细胞。 Ⅵ意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。

单克隆抗体Ⅰ优点：特异性强，灵敏度高，可大量制备 Ⅱ单克隆抗体（导向作用）+抗癌药物（杀伤作用） =“生物导弹” Ⅲ制备过程及原理：

动物细胞核移植技术

Ⅰ定义：将动物一个细胞的细胞核移入去核卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，进而发育成动物个体的技术。得到的动物称为克隆动物。动物的一个细胞的细胞核为供体，去核的卵母细胞为受体。 Ⅱ原理：动物细胞核的全能性。 Ⅲ繁殖方式：无性生殖。 Ⅳ分类：胚胎细胞核移植（难度小）和体细胞核移植（难度大）。

过程：

生物技术的安全性与伦理问题（了解）

9.战斗的基督教思维导图