微生物测试员培训思维导图模板大纲
菌落总数检测
菌落总数
琼脂营养基
称取营养琼脂33G（以陆桥为例，不同培养基按照说明书配比），加入蒸馏水或去离子水1L,搅拌加热煮沸完全溶解（一般搅拌均匀，不用煮沸），分装三角瓶。
取样品10G
加入200ML的生理盐水
自然沉降取上清液
平皿1
1ml样液
琼脂营养基（冷却至45℃）倒入平皿15-20ml,混合均匀。
平皿2
1ml样液
琼脂营养基（冷却至45℃）倒入平皿15-20ml,混合均匀。
平皿3
1ml样液
琼脂营养基（冷却至45℃）倒入平皿15-20ml,混合均匀。
平皿4
1ml样液
琼脂营养基（冷却至45℃）倒入平皿15-20ml,混合均匀。
空白平皿
琼脂营养基（冷却至45℃）倒入平皿15-20ml,混合均匀。
霉菌、酵母菌检验
沙氏营养基
称取沙氏营养基38G（陆桥为例，不同培养基具体看说明书），加入蒸馏水或去离子水1L,搅拌加热煮沸完全溶解（一般搅拌均匀，不用煮沸），分装三角瓶。
取样品10G
加入200ML的生理盐水
自然沉降取上清液
平皿1
1ml样液
琼脂营养基（冷却至45℃）倒入平皿15-25ml,混合均匀。
冷却凝固
翻转，培养25℃±2℃，培养7天（分别3.5.7天观察）。
平皿2
1ml样液
琼脂营养基（冷却至45℃）倒入平皿15-25ml,混合均匀。
冷却凝固
翻转，培养25℃±2℃，培养7天（分别3.5.7天观察）。
平皿3
1ml样液
琼脂营养基（冷却至45℃）倒入平皿15-25ml,混合均匀。
冷却凝固
翻转，培养25℃±2℃，培养7天（分别3.5.7天观察）。
平皿4
1ml样液
琼脂营养基（冷却至45℃）倒入平皿15-25ml,混合均匀。
冷却凝固
翻转，培养25℃±2℃，培养7天（分别3.5.7天观察）。
空白平皿
琼脂营养基（冷却至45℃）倒入平皿15-25ml,混合均匀。
冷却凝固
翻转，培养25℃±2℃，培养7天（分别3.5.7天观察）。
大肠菌群检测方法
取样液5ML
接种50ML乳糖胆盐发酵管
置35℃±2℃培养24h
产酸产气
划线接种伊红美蓝琼脂平板
观察平板上菌落形态。
典型的大肠菌落为黑紫色或红紫色，圆形，边缘整齐，表面光滑湿润，常具有金属光泽，也有的呈紫黑色，不带或洛带金属光泽，或红色，中心较深的菌落。
金黄葡萄球菌检测方法
取样液5ML
接种50ML SCDLP培养液中，充分混匀
置35℃±2℃培养24h
增菌液中取1-2环接种环，划线划线接种在血琼脂培养基上
置35℃±2℃培养24h
在血琼脂平板上该菌落呈金黄色，大而突起，圆形，不透明，表面光滑，周围有溶血圈。
血凝固酶实验
戏曲1：4新鲜血浆0.5ML，放灭菌小试管中，加入等量待检菌24h肉汤培养物0.5ml,混匀。放35℃±2℃温箱或水浴中，每半小时观察一次，24h之内呈现凝块即为阳性。
计数与计算：计算平板上的菌落总数。思维导图模板大纲
菌落呈片状生长的平板不宜采用；计数符合要求的平板上的菌落，按公式计算结果。
x1=a*k/5
x1=细菌菌落总数，cfu/g或cfu/ml
a=5块营养琼脂培养基平板上的细菌菌落总数
k=稀释度（1：20）
当菌落数在100内，按实有数报，大于100时采用二位有效数字。
如果样品菌落总数超过本标准规定，进行复检。
复检方法：
将留存的复检样品依前发复测2次，2次结果平均值都达到本标准的规定，则判定被检样品合格，其中有任何1次结果平均值超过本标准规定，则判定被检样品不合格。
计数与计算：计算平板上菌落数思维导图模板大纲
菌落呈片状生长的平板不宜采用；计数符合要求的平板上的菌落，按公式计算结果。
x2=a*k/5
x2=真菌菌落总数，cfu/g或cfu/ml
a=5块沙氏琼脂培养基平板上的细菌菌落总数
k=稀释度（1：20）
当菌落数在100内，按实有数报，大于100时采用二位有效数字。
如果样品菌落总数超过本标准规定，进行复检。
复检方法：
将留存的复检样品依前发复测2次，2次结果平均值都达到本标准的规定，则判定被检样品合格，其中有任何1次结果平均值超过本标准规定，则判定被检样品不合格。
霉菌：分布广泛，食品、农产品、纺织品、各种懂植物体，甚至是一些阴暗的建筑表面。
酵母菌：个体一般以单细胞状态存在，多数出芽繁殖，也有的裂殖，能发酵糖类产能，喜在含糖较高、酸度较大的环境中生长。思维导图模板大纲
规范中定义：样经过处理，在一定条件培养后（如培养基成分、培养温度、培养时间、PH值、需氧介质等），1g（ML）检样中所含菌落总数。思维导图模板大纲
凡乳糖胆盐发酵管产酸产气，乳糖发酵发酵管产酸产气，在伊红美蓝平板上有典型大肠菌落，革兰氏染色为阴性无芽孢杆菌，可报告被检样品检出大肠杆菌。思维导图模板大纲
凡在琼脂平板上有可疑菌落生长，镜检为革兰氏阳性葡萄球菌，并能发酵甘露醇产酸，血浆凝固酶实验阳性者，可报告被检样品检出金黄色葡萄球菌。思维导图模板大纲
U666430174
U666213371
