色谱分离法思维导图

U731931509

2023-09-25

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色谱技术

两种分配色谱

氧化铝色谱法

吸附色谱

色谱分离法基本知识和技术详解

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思维导图大纲

色谱技术

氧化铝色谱法

定义：利用作为固定相的氧化铝对混合物中各种成分吸附能力的大小不同，使各成分得到相互分离的方法

氧化铝有酸性、碱性、中性三种规格，含水量增加，吸附能力减弱

适用于碱性或中性的亲脂性成分的分离

硅胶色谱法

定义：利用作为固定相的硅胶对混合物中各种成分吸附能力的强弱不同，使各成分得到相互分离的方法

硅胶能与许多化合物形成氢键而产生吸附作用，硅胶是一种酸性、亲水性的吸附剂，硅胶的活化不宜在高温下进行

适用于中性或酸性成分的分离

两种分配色谱

正相分配色谱

极性大为固定相，小为移动相，用于分离极性较大的成分，如生物碱、糖类、苷类、有机酸等

反相分配色谱

极性小为固定相，大为移动相，用于分离极性小的成分，如油脂、高级脂肪酸、游离甾体等

活性炭色谱法

定义：利用作为固定相的活性炭对混合物中各种成分吸附能力不同，使各种成分得到相互分离

适用于分离水溶性成分，如氨基酸、糖类及某些苷类等，也适用于大量制备性分离

聚酰胺色谱法

定义：利用作为固定相的聚酰胺分子内存在的酰胺基，能使酚类的羟基、酸类的羧基及醌类的醌基形成氢键而产生吸附作用，使混合物中各成分得到相互分离

氢键能力强弱

聚酰胺在水中形成氢键能力最强，在有机溶剂中较弱，碱性溶剂中最弱

能形成氢键的基团

基团位置：间位>对位>邻位

芳香核、共轭双键的数量

化合物若能形成分子内氢键，则被吸附能力减弱

适用于能与聚酰胺形成氢键吸附的化合物，如黄酮类、鞣质等成分的分离

离子交换色谱法

定义：利用离子交换树脂上的功能基团能在水溶液中与溶液中的离子进行可逆性交换的性质，以离子交换树脂为固定相，使混合成分中的离子型与非离子型或具有不同解离度的离子化合物分离

分类

阳离子交换树脂

阴离子交换树脂

适用于分离有解离能力的酸性、碱性及两性化合物

大孔吸附树脂法

定义：利用大孔吸附树脂具有的吸附性能及分子筛作用，使相对分子质量及吸附能力不同的混合物中各成分获得分离

对于非极性的树脂，洗脱剂的极性越小，洗脱能力越强；对于中极性和极性树脂，则宜选用极性较大的洗脱剂

适用于水溶性成分如皂苷的分离

凝胶色谱法

定义：以凝胶作为固定相，选择适当的溶剂进行洗脱，是混合物中相对质量不同的化合物得到分离

分类

葡聚糖凝胶

葡聚糖和甘油通过醚桥相交连而成的多孔性网状结构物质

网孔大小取决于交联剂的比例，若交联剂多，则交联度大，网孔紧密

葡聚糖凝胶LH-20

聚丙烯酰胺凝胶

试样上柱前要滤过或离心

影响柱效的因素

柱压——限制性因素

柱填料（种类、粒度、均匀程度）

柱长越长，柱效越好

溶剂系统（合适流速、洗脱方式）

适用于天然药物化学成分中大小分子化合物的分离

薄层色谱法

定义：将适宜的固定相均匀涂布于平面载板上成一薄层，目标分离试样于薄层板上点样，随着展开剂的移行，混合物中各成分根据吸附性能或分配系数的不同而获得分离

常用固定相：氧化铝、硅胶、聚酰胺等吸附剂和硅藻土、纤维素等支持剂

若固定相为水，常可制备纤维素薄板和硅藻土薄板

操作步骤：制板、点样、展开、显色、测定比移值

点样时试样浓度使用时再稀释成1%—0.01%的浓度

比移值=原点至色谱斑点中心的距离/原点至溶剂前沿的距离

适用于天然药物各种化学成分的分离鉴定，并可配合柱色谱做跟踪分离，指导选择溶剂系统

纸色谱法

定义：以滤纸为支持剂，滤纸上吸附的水为固定相，用一定的溶剂系统为移动相进行展开，而使各组分达到分离

适用于极性成分的分离

电泳技术

定义：利用混合物中各成分所带电荷性质、电荷数量及分子质量的不同，一定的时间内，各成分在同一电场中泳动的方向和速率不同，使各自移动距离不同而获得分离

分类

纸电泳

琼脂糖凝胶电泳

聚丙烯酰胺凝胶电泳

适用于生物碱、有机酸、氨基酸、蛋白质、糖类等天然药物化学成分的分离和鉴定

干柱色谱法

定义：将干燥的填充剂直接装入色谱柱后进行色谱分离

对于溶于洗脱剂的试样选用溶液加样法，对于不溶于洗脱剂的试样选用拌样加样法

适用于制备性分离

气相色谱法

定义：以气体作为流动相，利用混合物中各组分在气体与固定相之间吸附能力的不同或分配系数的差异而获得分离

适用于具有沸点低、易挥发特性的化合物如挥发油的分离、鉴定和定量分析

色谱柱内径越小，长度越长，分离效果越好，柱长一般为1-5cm

高效液相色谱法

定义：在经典液相色谱和气相色谱的基础上发展而成的高效、快速、高灵敏的色谱分离方法

分类

液固色谱法

液液色谱法

适用于各种化合物的分离，具有高效、快速、高灵敏的特点

基本知识

概念

一种分离、纯化和鉴定化合物的现代理化分离分析方法

分类

按色谱分离原理不同

吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、凝胶色谱、电泳技术

按操作方式的不同

柱色谱、纸色谱、薄层色谱、毛细管电泳色谱

按固定相或支持剂种类的不同

氧化铝色谱、硅胶色谱、聚酰胺色谱、凝胶色谱

按移动相种类的不同

气相色谱、液相色谱、超临界流体色谱

基本原理

吸附色谱

利用作为固定相的吸附剂对混合物中各成分吸附能力的大小不同

分配色谱

利用混合物中各成分在互不相溶的两相溶剂中分配系数的不同而获得分离

离子交换色谱

利用离子交换树脂上的功能基团在水溶液中与溶液的其他离子进行可逆性交换的性质

凝胶色谱

以凝胶作为固定相，选择适当的溶剂作为移动相，混合物中相对质量大小不同的化合物移动速率不同而得到分离

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2.4

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色谱鉴别法思维导图

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1.82

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