水溶性色素:取本品0.5g,加水10ml,振摇后放置片刻,水层不得显深蓝色。
标准曲线的制备:精密量取对照品溶液1ml,2ml,3ml,4ml和5ml,分别置10ml量瓶中,加水至刻度,摇匀。照紫外-可见分光光度法,在610nm的波长处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。
测定法:取本品细粉约0.4g,精密称定,照对照品溶液的制备项下的方法,自“置锥形瓶中”起,至“精密量取续滤液5ml”,置50ml或100ml量瓶(使吸光度在0.20~0.45之间)中,加水至刻度,摇匀,在610nm的波长处测定吸光度,从标准曲线上读出供试品溶液中靛蓝的重量(μg),计算,即得。
靛玉红:取本品细粉约1.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入三氯甲烷50ml,称定重量,水浴中加热回流4小时,放冷,再称定重量,用三氯甲烷补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,作为供试品溶液。另取靛玉红对品适量,精密称定,加三氯甲烷制成每1ml含0.07mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录VIB)试验,精密吸取供试品溶液2μl或4μl,对照品溶液1μl与3μl,分别交叉点于同一硅胶G薄层上,以苯-三氯甲烷-丙酮(5:4:1)为展开剂,展开,取出,晾干,在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板,周围用胶布固定,照薄层色谱法(附录ⅥB薄层色谱扫描法)进行扫描,波长:λS=540nm,λR=700nm;测量供试品吸光度积分值与对照品吸光度积分值,计算,即得。