分光光度法(SP)包括紫外分光光度法(UV)、荧光分光光度法(Fluor)和原子吸收分光光度法(AA)等,是常用的仪器分析方法。由于其专属性差,容易受血液中其他成分的干扰,在测定前必须进行分离,单独用于血药浓度测定时常常受到限制,在灵敏度、精密度和准确度方面逊于色谱法。但这种方法具有操作简单、价格低廉、速度快等优点,如与层析法结合使用,可提高其专属性。
气相色谱法(GC)是将被测样品在一定温度下瞬间气化,由移动相带入固定相,具有速度快、分离效率高等优点。可用于低沸点、易汽化、热稳定性好的化合物。
高效液相色谱法(HPLC)是目前使用较普遍的方法,其弥补了气象色谱不能分离不挥发且具有一定溶解性物质的不足。常用的检测器有紫外检测器、荧光检测器和电化学检测器等。紫外检测器最小检出量为5×10-10克/毫升,适用于检测能吸收该波长紫外光的物质;荧光检测器最小检出量10-9克/毫升,适用于某些生物物质及药物代谢物等;电化学检测器最小检出量为20皮摩尔/毫升,适用于检测一些可电离的物质。
免疫学方法(IA)包括放射免疫法(RIA)、酶免疫法(EIA)和荧光免疫法(FIA)等,本法不需要事先分离,且灵敏度高、取样量少。放射免疫法是应用液体闪烁仪或γ谱仪来测量放射性强度,适用于批量测定,但需要有同位素的防护设备;酶免疫法可以不用放射性同位素,成本低,测定速度快,测定一个样品仅需几分钟,仪器设备也很简单,缺点是必须有大量的样品源,否则会造成试剂盒的浪费,反而使成本提高;荧光免疫法是一种新发展起来的方法,其灵敏度高,稳定性好。