1）进入手术室必须更换鞋衣裤、帽，手术室的鞋、外出鞋应分区存放。
2）天花板、墙壁、地面无裂隙，表面光滑，有良好的排水系统，便于清洗和消毒。
3）经血传播疾病病原学诊断阳性者，应在手术通知单注明；特殊感染病人手术通知单上应注明感染情况，严格隔离管理。术后应进行严密消毒处理。手术器械及物品双消毒后再处理；病理标本按隔离要求处理。手术间严格终末消毒。
4）医务人员必须严格遵守消毒灭菌制度和无菌技术操作规程。有上呼吸道感染、手部外伤、皮肤病的医护人员不宜参加手术。
5）环境清洁。每天第一台手术前，湿檫去所有平面上的灰尘。手术过程中，清除溢出物，收好感染性废物；手术后，现场清洗仪器、器具和墙壁，清洁物桶、手术台，只在需要的时候有清洁拖把清洁手术台周围；一天手术结束后，清洗所有器具、光源和照明设备，清洗所有地板，清洁物桶；现场清洗托盘架、把手、刷手水槽、过道、通风面板和天花板上的仪器。定期清洁高压灭菌器、休息室、存储区、冰箱、暖箱、墙壁和天花板。
6）换气。手术室每小时换气20次，保持20%新鲜空气，双过滤系统，正压。空气传播和飞沫感染地保持负压。保持门窗关闭。温度20～23℃。湿度30%～60%.
7）凡进入人体组织的各种手术器械、导管、内置器械等必须一用一灭菌，注明灭菌有效期，过期重新处理。能压力蒸汽灭菌的应避免使用化学灭菌剂浸泡灭菌。
8）麻醉用器具应定期清洁、消毒，医.学教育网搜集整理接触病人的用品应一用一消毒；严格遵守一次性医疗用品的管理规定。
10）手术室内设消毒供应间的管理参见消毒供应室消毒隔离管理制度。
11）开手术包前后均要检查化学指示胶带和压力蒸汽灭菌指示卡。如高压灭菌的手术包潮湿不得使用，应重新包装、消毒。
12）严格限制手术室内人员数量，严格控制参观人数，参观者不可任意进入其他手术间或无菌储藏间。
13）凡手术中切除的坏死组织、污染物、体液等医疗废物须置黄色并有明显标识的塑料袋内，封闭运送，立即从污物通道送出手术间。
14）接送病人的平车定期消毒；车轮应每次清洁，车上物品保持清洁。接送隔离病人的平车应专车专用，用后严格消毒。手术室的车床与病房的不能混用，车床最好设有交接处。
