1.血常规化验单纯疱疹病毒感染如无继发感染，一般白细胞总数不升高，但淋巴细胞比例可能升高。血常规化验有助于了解有无继发感染及全身状况。
2.疱疹涂片取疱疹的基底物直接涂片，巴氏染色或直接免疫荧光检查可见病毒损伤的细胞，如气球样变的细胞以及多核巨细胞、核内包涵体等，可初步判定为疱疹病毒感染。
3.单纯疱疹病毒的分离培养这是确诊的主要方法。早期是将疱液接种在鸡胚绒膜尿囊膜上，近年来接种在兔肾细胞、人羊膜或鸡胚母细胞上分离培养。但由于受实验室条件限制，临床较少使用。
4.血液检查包括对HSV特异的免疫血清学和免疫功能检查。血清学检测特异性IgM抗体或双份血清抗体效价递增4倍以上，均具有诊断价值。而对诊断有意义的抗HSV结构蛋白的IgG抗体在感染晚期出现。复发感染时，产生的IgG抗体是对非结构蛋白的抗体。对于严重的慢性、进行性的单纯疱疹感染，应进行体液及细胞免疫功能的检测，以除外全身感染（如艾滋病）及器质性疾病。
5.细胞学诊断最简便，方法是在疱疹的顶部或基底部做细胞涂片，用瑞忒（Wrights）染色检查多核的巨细胞和核内嗜酸性包涵体（呈“枭眼状”）。此法具有特异性，其敏感性相当于病毒学检查的2/3.6.组织活检单纯疱疹的水疱是位于表皮或上皮内的。上皮细胞的空泡状变性致棘层松解。病变的上皮基底细胞核内出现嗜酸性核内体，此小体的体积逐渐增大形成所谓“包涵体”（A型内包涵体），此细胞称为“病毒巨细胞”。黏膜的病理与皮肤不同点是无液体而有许多纤维结缔组织及密集的水肿的“罩细胞”（roofcells）。
7.用血清学及DNA内切酶PCR技术，或病毒蛋白的电泳法可鉴别HSV-Ⅰ型与Ⅱ型，但血清学方法对新生儿感染的早期诊断无意义。
8.荧光素标记抗体技术是一种快速诊断方法。在疱疹基底的刮出液中，将两滴磷酸缓冲生理盐水置于含有液体的载片上混合，于空气中干燥固定，用兔的抗疱疹血清及荧光标签的抗兔球蛋白（抗抗体）染色（即间接法）可见荧光阳性。
9.血清免疫学用酶联免疫吸附试验方法测定IgM，IgG水平上升有诊断价值。
